更新時間:2024-11-01
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一、Morris水迷宮分析系統(tǒng)實驗介紹
Morris水迷宮(Morriswatermaze,MWM)實驗是一種強迫實驗動物(大鼠、小鼠)游泳,學(xué)習(xí)尋找隱藏在水中平臺的一種實驗,主要用于測試實驗動物對空間位置感和方向感(空間定位)的學(xué)習(xí)記憶能力。被廣泛應(yīng)用于學(xué)習(xí)記憶、老年癡呆、海馬/外海馬研究、智力與衰老、新藥開發(fā)/篩選/評價、藥理學(xué)、毒理學(xué)、預(yù)防醫(yī)學(xué)、神經(jīng)生物學(xué)、動物心理學(xué)及行為生物學(xué)等多個學(xué)科的科學(xué)研究和計算機(jī)輔助教學(xué)等領(lǐng)域,在世界上已經(jīng)得到廣泛地認(rèn)可,是醫(yī)學(xué)院校開展行為學(xué)研究尤其是學(xué)習(xí)與記憶研究的經(jīng)典實驗。
二、技術(shù)規(guī)格
1.采用AcrylonitrileButadieneStyrene,High-densityfoam,Wavecrestsponge,聚甲基丙烯酸甲酯板、丙烯腈-丁二烯-苯乙烯共聚物等材質(zhì)制作,無毒無氣味,拆卸方便,易清洗。
2.具有輸入模塊(觸摸屏或鍵盤或啟動開關(guān)、無線遙控等)、輸出模塊(顯示屏、指示燈等),實驗人員可進(jìn)行不同通道異步啟動及異步結(jié)束等復(fù)雜操作及方便監(jiān)測,減少人力并提高了實驗精度。
3.采用采用SDK3000,sdk2000或USB視頻采集,可接筆記本電腦及臺式電腦,采用InterVideo5.0編碼AVI微損壓縮,640×480分辨率下1GB/h,320×240分辨率下350MB/h
4.攝像機(jī)系統(tǒng)采用1/3"SONYSuperHADCCD圖像傳感器,下限照度:0.1Lux/F1.2,型號VC-123或VC-526D
5.可在星光條件下進(jìn)行視頻分析,對動物的干擾更小采用開放式、模塊化設(shè)計,系統(tǒng)可擴(kuò)展性強,可外接其他的分析模
6.可升級具備無線WIFI通信數(shù)據(jù)交換功能
7.水池帶輪子,可隨意移動位置
8.帶水溫攪拌泵,溫度可均勻擴(kuò)展.
9.水池四個象限有不同符號的導(dǎo)航標(biāo)識
10.具備溫度控制器,參數(shù)如下:
u含藍(lán)色液晶屏,實時顯示水溫和并根據(jù)設(shè)定溫度進(jìn)行恒溫控制
u具備防觸電跳閘系統(tǒng),保護(hù)人和動物安全
u電源電壓:220V±10%~50HZ,負(fù)載電流:16A,
u溫設(shè)范圍:5~85℃,溫控容差:±1℃,溫度校正范圍:±9℃
u過熱保護(hù)溫度:出廠設(shè)置為40℃(可調(diào)),自動防凍功能:出廠設(shè)置為8℃(可調(diào))
三、軟件介紹
1.采用實驗用戶與訪客登錄設(shè)計,實驗用戶實驗均需輸入密碼方可進(jìn)入用戶可設(shè)置彼此獨立的實驗數(shù)據(jù)文件,實驗數(shù)據(jù)資料便于儲存管理;
2.軟件支持RadioPowerOn功能
3.具有多事件標(biāo)記器,在處理時可人工修正軌跡誤差,具有軌跡跟蹤、事件記錄及活動記錄三種記錄方式
4.采用*進(jìn)的ImageDenoising、VACA、subtraction、Binarizationalgorithm、Edgemeasurement等技術(shù),確保實驗數(shù)據(jù)穩(wěn)定可靠
5.多時段分析,可對不同組間動物的不同時段的實驗結(jié)果進(jìn)行分段比較,便于觀測藥效。
6.自定義實驗名稱、分組、動物編號及實驗層次。軟件可設(shè)置對實驗訓(xùn)練方法提供每組一只、按組依次等多種實驗訓(xùn)練方法,按預(yù)設(shè)值自動進(jìn)行快速、多動物量的實驗。同時除了提供單次錄像外,還提供批量錄像功能可快速簡化提高實驗效率。
7.軌跡點坐標(biāo)序列數(shù)據(jù)和指標(biāo)結(jié)果可導(dǎo)入到Excel,并進(jìn)行直方圖\曲線\軌跡的處理,便于用戶在SPSS、SAS等生物分析統(tǒng)計軟件中作進(jìn)一步分析處理
8.面向科研和計算機(jī)輔助教學(xué)(CAI),能夠記錄原始的視頻圖像提供完整的實驗數(shù)據(jù)庫功能,作為研究的真實記錄和今后進(jìn)行教學(xué)演示的素材
四、實驗指標(biāo)
l結(jié)果參數(shù):總時間、總路程、平均速度,上臺前時間(潛伏期)、路程、平均速度,各象*、路程,站臺周邊四個區(qū)時間、路程,水池中央?yún)^(qū)時間、路程,水池周邊區(qū)時間、路程,初始角,穿越平臺次數(shù),上臺情況總結(jié),四象限活動百分比(第一象限活動路程、第一象限活動時間、第二象限活動路程、第二象限活動時間、第三象限活動路程、第三象限活動時間、第四象限活動路程、第四象限活動時間),上臺前速度、中心活動路程、中心活動時間、周圍活動路程、周圍活動時間、站臺周圍范圍I活動路程、站臺周圍范圍I活動時間、站臺周圍范圍II活動路程、站臺周圍范圍II活動時間、站臺周圍范圍III活動路程、站臺周圍范圍III活動時間、站臺周圍范圍IV活動路程、站臺周圍范圍IV活動時間、站臺穿越次數(shù)等50個指標(biāo)和軌跡圖,可參數(shù)化設(shè)置的探索策略軟件自動判別。
五、實驗范例
1.獲得性訓(xùn)練(Acquisitionphase)
1)實驗裝置通常放置在安靜寬敞的房間內(nèi),可在墻壁上懸掛一些圓形、三角形等物體作為動物的視覺線索(visualcues)。在設(shè)備周圍拉上黑色圍簾以阻隔實驗者和受試動物。將實驗裝置分為4個象限,內(nèi)注入自來水,水高23cm,水溫保持在25±1.0°C;于其中一象限中心置一有機(jī)玻璃制圓形平臺,高度可調(diào)節(jié),直徑10cm(大鼠)或5cm(小鼠)。,位于水面下1.5-2cm(大鼠)或1–1.5cm,并根據(jù)所采用的動物毛色利用在水中加奶粉(黑色小鼠)或者用墨汁將池水染黑(白色大鼠)增強動物和周圍環(huán)境的對比度,并隱藏站臺。下面以大鼠為例簡單介紹水迷宮實驗。
2)參照學(xué)習(xí)實驗(cuedlearningtest):在水迷宮定位航行實驗前,需要進(jìn)行參照學(xué)習(xí)實驗,檢測不同組大鼠游泳能力、視覺狀態(tài)的差異。將平臺升出水面約1.5-2cm;大鼠從任一隨即象限入水其尋找平臺,找到平臺后在平臺上休息30s,然后用同樣實驗方法立即開始下一次測試,測量找到平臺所需要的時間。
3)定位航行實驗、(NavigationTest):將大鼠隨機(jī)地頭朝池壁按東北、西北、東南、西南4個入水點輕輕放入水池中。每次試驗每只大鼠多游泳90s,讓其找到水中隱藏的平臺。記錄大鼠自入水至找到平臺四肢爬上平臺所需的時間,作為逃避潛伏期。大鼠爬上平臺后,讓其停留30s;若入水后給定時間內(nèi)未能找到平臺或未能爬上平臺,則將時間記錄為90s,并且將其人為放置于平臺上30s,然后從平臺上取下休息30s,再進(jìn)行下一次訓(xùn)練。按此方法每只動物每天訓(xùn)練4次,連續(xù)訓(xùn)練4-6天。
4)統(tǒng)計學(xué)處理:對于定位航行實驗,將每只動物每一天四次檢測時找到平臺所需時間和游泳距離取均值,使用SPSS軟件,數(shù)據(jù)采用two-repeatedANOVA分析;對于空間探索實驗,將每次動物兩次測試成績分別取均值,不同動物組間采用one-wayANOVA分析;對于參照學(xué)習(xí)實驗,將每只動物的四次檢測成績?nèi)【?,組間采用one-wayANOVA分析。
3.對位訓(xùn)練(reveralphase)
測定動物的工作記憶(workingmemory)。探查訓(xùn)練結(jié)束后的第二天,開始維持4天的對位訓(xùn)練。將平臺放在原先平臺所在象限的對側(cè)象限,方法與獲得性訓(xùn)練相同。每天訓(xùn)練4次。每次記錄找到平臺的時間和游泳距離以及游泳速度。
4.對位探查訓(xùn)練(probetrial2)
末次一次對位訓(xùn)練的第二天進(jìn)行。方法與上述探查訓(xùn)練類似。記錄動物60s內(nèi)動物在目標(biāo)象限(平臺二次所在區(qū))所花時間和進(jìn)入該區(qū)的次數(shù)。
注意事項
1、對比食物驅(qū)動的模型(如放射臂迷宮),水迷宮實驗的優(yōu)點在于,動物具有更大的、逃離水環(huán)境的動機(jī)。而且不必禁食,特別適合老年動物的測試。加上它對衰老引起的記憶減弱尤其敏感,因此,水迷宮常用于老年動物記憶的研究。
2、如用小鼠,除游泳池尺寸約為大鼠的50%以外,平臺直徑也較少(187.5px)。實驗方法與大鼠類似,但訓(xùn)練周期較短。一般獲得性訓(xùn)練3天共訓(xùn)16次(第一天4次,后兩天每天6次;兩次訓(xùn)練之間的間隔5~10min,第四天為探查訓(xùn)練,第五、六天為對位訓(xùn)練,每天訓(xùn)練六次,第七天為第二次探查訓(xùn)練。
3、如用肉眼觀察,在所有試驗過程中試驗著始終坐在同一位置,距離泳池近的邊緣約1500px。
4、每天在固定時間測試。操作輕柔,避免不必要的應(yīng)激刺激。
5、當(dāng)與其他同類實驗相比較時,要注意到動物的性別、品系、泳池的尺寸和水溫等多種因素對實驗結(jié)果的影響。此外,當(dāng)以游泳速度作為觀察指標(biāo)時,要考慮到動物的體重、年齡以及骨骼肌發(fā)育狀況等對游泳速度可能造成影響。
6、用老年動物進(jìn)行實驗時,應(yīng)確認(rèn)動物的游泳能力和視力不因年齡增大而影響行為操作。其方法如下:將平臺露出水面以使動物能夠看見平臺。動物放入泳池后如毫無困難地直接游向平臺,說明動物的游泳能力和視力均正常,可以開始實驗。
7、游泳對動物是一個較大的應(yīng)激刺激,可引起神經(jīng)內(nèi)分泌的變化。這些變化可能對實驗結(jié)果造成干擾。對老年動物,嚴(yán)重時可誘發(fā)心血管疾病而導(dǎo)致卒中甚至死亡。因此,必要時可將動物多次放入泳池或適當(dāng)延長其游泳時間以增加動物對游泳的適應(yīng)能力。
8、當(dāng)用牛奶或奶粉攪渾泳池的水時,要定期換水以免水腐壞變質(zhì);如用白漆達(dá)到同樣目的時,必須確保白漆對動物沒有毒性。
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